Se ubica en el Anexo de la Catedral Basílica de Nuestra Madre Santísima de la Luz. Tiene 15 salas donde se exhiben más de 400 piezas de arte sacro: pinturas y esculturas de los siglos XVII y principios del XX, gobelinos, estandartes, libros y objetos religiosos antiguos e indumentaria sacerdotal. Destaca la indumentaria que usó el Papa Benedicto XVI en su visita a León. Hay obras de artistas plásticos de la Colonia, como Miguel Cabrera y Juan Correa; del siglo XIX como Francisco Serrato y Francisco Martínez, y de autores más recientes, como Juan Nepomuceno Herrera, Antonio Segoviano, Arturo Joel Padilla, Manuel Álvarez del Castillo y del escultor Carlos Terrés.

Crédito fotográfico: Archivo Museo de Arte Sacro 

Santísima Trinidad
Anónimo
3.30 x 3.85 m.
Siglo XIX

Crédito fotográfico: Archivo Museo de Arte Sacro

La Divina Providencia
Antonio Segoviano
Siglo XX

Crédito fotográfico: Archivo Museo de Arte Sacro

Asunción de la Santísima Virgen María
Anónimo
1.84 x 1.08 m.
Siglo XIX

Crédito fotográfico: Archivo Museo de Arte Sacro

San Juan Nepomuceno Confesando a la Reina de Bohemia
Anónimo
1.085 x 1.645 m.  
Siglo XVIII

Crédito fotográfico: Archivo Museo de Arte Sacro

El Cristo Mexicano
Carlos Terrés
Siglo XX

Crédito fotográfico: Archivo Museo de Arte Sacro

Pendón pintado sobre lona representando a Cristo Crucificado
Monacelli
4.25 x 2.15 m.
Siglo XIX

Crédito fotográfico: Archivo Museo de Arte Sacro